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China Feed ›› 2022, Vol. 1 ›› Issue (24): 45-51.DOI: 10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2022030054-11

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  • Online:2022-12-20 Published:2023-01-31

红三叶草提取物中四种异黄酮的HPLC检测方法

  

  1. 李彦军,  郑   楠,  王加启,  赵圣国*
    (中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京 100193)

摘要: 本研究的目的是建立一种可以同时测定红三叶草提取物中大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆素A含量的高效液相色谱检测方法。采用χBridge C18(250 mm×4.6 mm,5 μm,Waters)色谱柱,以甲醇(A)和10 mmoL磷酸氢二钠溶液(B)为流动相,流速为1 mL/min,进样量为10 μL,在不同的洗脱梯度、检测波长和柱温下检测四种异黄酮的含量。确定了最佳色谱条件:柱温为40 ℃,检测波长为270 nm,洗脱梯度为:0 ~ 5 min,20% ~ 40% A|5 ~ 20 min,40% ~ 75% A|20 ~ 23 min,75% ~ 100% A|23 ~ 26 min,100% A|26 ~ 26.5 min,100% ~ 20% A|26.5 ~ 35 min,20% A。结果表明:四种异黄酮在浓度为1 ~ 50 μg/mL时具有良好的线性关系(R2>0.999),保留时间稳定,精密度和稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于2%,加标回收率为96% ~ 100.10%。建立的检测方法符合分析方法学评价的要求,可用于同时检测红三叶草提取物中的鹰嘴豆素A等四种异黄酮。
[关键词] 红三叶草提取物|鹰嘴豆素A|HPLC|异黄酮

关键词: 红三叶草提取物, 鹰嘴豆素A, HPLC, 异黄酮

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