China Feed››2024,Vol. 1››Issue (9): 53-59.DOI:10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2023040049-01
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作者简介:王永浪,动物科学专业,E-mail:2523687058@qq.com
*通讯作者:孔志伟,博士,助理教授,研究方向为反刍动物饲料资源开发与利用,E-mail:kongzhiwei2013@126.com
摘要:本试验采用细胞增殖试验、流式细胞术检测试验、Western blot试验、Hochest33342染色荧光显微镜检测等探究不同氮源(蛋氨酸与氯化铵)对瘤胃上皮细胞凋亡的影响及其可能的调控机制。结果表明:对瘤胃上皮细胞来说,处理36 h时,添加0.12 mmol NH4Cl组和0 mmol Met缺失组的OD值均达到对照组的一半,且均显著低于0.048 mmol Met组、0.12 mmol Met组(对照组)和0.048 mmol NH4Cl组(P <0.05),0 mmol Met组比0.12 mmol NH4Cl组细胞活性显著降低(P < 0.05)|添加0 mmol Met组的总凋亡率和晚期凋亡率最高,显著高于0.12 mmol Met组(对照组)和0.12 mmol NH4Cl组(P < 0.05),而0 mmol Met组和0.12 mmol NH4Cl组的早期细胞凋亡率均显著高于0.12 mmol Met组(对照组)(P < 0.05)|与对照组相比,0.12 mmol NH4Cl组和0 mmol Met组的线粒体膜电势分别显著下降到71.99%和67.67%|与对照组相比,0 mmol Met组和0.12 mmol NH4Cl组的促调亡蛋白Caspase-3、Bax和p53的表达均显著上调(P < 0.05),抑调亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达均显著下调(P < 0.05)|与对照组相比,0 mmol Met组和0.12 mmol NH4Cl组的p-mTOR和p-AMPK蛋白的表达均显著上调(P < 0.05),而PI3K和p-AKT的蛋白表达量显著下调(P < 0.05)。综上,蛋氨酸缺乏会诱导瘤胃上皮细胞发生凋亡,NH4Cl替代可以缓解凋亡的发生,其诱导过程可能通过PI3K-Akt-mTOR信号通路和AMPK-mTOR信号通路完成,该结果说明了蛋氨酸不可或缺的重要性,可为反刍动物的配合饲料发展研究提供参考。[关键词] 瘤胃上皮细胞|细胞凋亡|蛋氨酸|氯化铵
关键词:瘤胃上皮细胞,细胞凋亡,蛋氨酸,氯化铵
CLC Number:
S811.2
王永浪, 叶恒博, 曹应东, 沈宇龙, 黄俊武, 农谨祯, 孔志伟. 不同氮源对瘤胃上皮细胞凋亡的影响[J]. 中国饲料, 2024, 1(9): 53-59.
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