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China Feed ›› 2023, Vol. 1 ›› Issue (23): 26-35.DOI: 10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.2023010019-08

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  • Online:2023-12-05 Published:2024-01-29

高产角蛋白酶弯曲假单胞菌的筛选鉴定、发酵条件优化及酶学性质

  

  1. 谢晨杰1,  宋超东1,  谭柄福1,  杨登峰2,  申乃坤1,  姜明国1,  张红岩1 *
    (1.广西民族大学海洋与生物技术学院,广西多糖材料与改性重点实验室,广西海洋微生物资源产业化
    工程技术研究中心,广西南宁 530008|2.广西科学院北部湾海洋研究中心,
    广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室,广西南宁530007)
  • 基金资助:
    广西民族大学引进人才项目(2018KJQD17)|广西科技重点研发计划项目(AA18242026,AB21196019,AB21220020)|国家自然科学基金项目(31660022,32060020)|广西研究生教育创新计划课题(YCSW2022256)|大学生创新创业训练计划课题(202110608014,S2022106008164,S202210608156)|广西民族大学实验技术创新与实验室管理研究课题(2019MDSY010,2020MDSY006)
    作者简介:谢晨杰,硕士研究生,研究方向为微生物资源挖掘,E-mail:xiechenjie2021@163.com
    *通讯作者:张红岩,教授,E-mail:hongyanzhang2008@163.com

摘要: 从海洋环境中筛选得到了1株高产角蛋白酶的菌株,经鉴定命名为弯曲假单胞菌(Pseudomonas geniculata) Gxun-15。经过单因素试验和正交优化,得到该菌最佳培养基组成及产酶条件为:初始pH 7.5,羽毛含量2.5%(m/V),酪蛋白1 g/L,蔗糖40 g/L。优化后酶活力可达674.39 U/mL,较优化前(202.35 U/mL)提高了3.3倍。酶学性质分析表明,该角蛋白酶最适作用温度和pH分别为60 ℃和6.5 ~ 8.0。化学试剂β-巯基乙醇可使酶活提高5倍,十二烷基磺酸钠(SDS)和苯甲基磺酰氟(PMSF)能抑制该酶酶活。羽毛降解产物中共检测到16种氨基酸,其中7种为必需氨基酸,总的游离氨基酸含量为221.24 mg/L,其中苯丙氨酸含量最高为118.36 mg/L。综上,海洋来源的P. geniculata Gxun-15具有高效分泌角蛋白酶的能力,所产角蛋白酶为丝氨酸蛋白酶,具有较强的化学试剂稳定性。该菌的羽毛降解产物中富含多种氨基酸,在饲料方面具有较好的应用潜力。
[关键词] 羽毛降解菌|角蛋白酶|弯曲假单胞菌|条件优化|酶学性质

关键词: 羽毛降解菌, 角蛋白酶, 弯曲假单胞菌, 条件优化, 酶学性质

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