摘要:对2个不同加工方式生产的中国“双低”菜粕A和B以及1个加拿大卡诺拉菜粕进行了体外消化和肉鸡饲养及代谢试验，以评价其营养价值。体外消化试验结果表明，卡诺拉菜粕、样品A和样品B的可消化蛋白质含量分别为73.6%、59.0%和51.0%(P<0. 01)；2周的肉鸡生长试验表明，试验各期生长速度、采食量和饲料转化率差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)；代谢试验结果表明氮沉积率组间差异显著(P<0.05)。过热处理时，与中性洗涤纤维相连的蛋白质消化率降低(P<0.01)，是导致氮沉积率低和肉鸡生长性能差的直接原因。试验结果也表明，过热处理或热处理不足，都对“双低”菜籽饼粕质量产生严重影响。
关 键 词： 体外消化；肉鸡；“双低”菜粕；可消化蛋白质；生产性能；氮沉积率；中性洗涤纤维氮消化率
中图分类号：S816.430.32；S831.5 文献标识码：A 文章编号：0258-7033(2000)05-0015-03
“双低”菜粕是极具潜力的蛋白质饲料资源。其品质不仅与品种、类型、种植时的气候、土壤条件有关，而且受加工过程的影响极大。大量的研究已证实，“双低”菜粕的品质对加工过程的热处理十分敏感。过热处理时，饼粕氨基酸特别是赖氨酸的含量和有效性均受到严重的损害，这种损害主要是形成了迈拉德反应(mailard reaction)的产物［1］；而热处理不足时，则不能使菜籽中的黑芥子酶(myrosine)失活(彭健，1999)［2］。则加重饲喂时硫苷对动物的毒性。因此，必须对“双低”菜粕的品质作出适当的评价，以利于生产中恰当地使用这些原料。化学分析的方法可以提供一些十分有益的信息，如过热处理的样品B中中性洗涤纤维(neutral detergent fiber,NDF)含量升高，而且与纤维物质相连的蛋白质也增加［2］。已有研究表明，NDF的量与蛋白质的消化率呈负相关(r=-0.089)［3］，但对与纤维相连的蛋白质的消化率的直接报道尚不多见。
本研究采用化学分析、体外消化和肉鸡试验的方法，来进一步评价加工方式对“双低”菜粕品质的影响。试验在加拿大曼尼托巴大学(University of Manitoba)进行。
1 材料和方法
1.1 材料 两个中国新培育的双低油菜饼粕样品A和B，硫苷含量分别为4.74和48.52ìmol/g脱脂干物质。加拿大卡诺拉饼粕样品中硫苷含量为10.12靘ol/g脱脂干物质。样品A的加工方式为蒸炒压榨，样品B和卡诺拉为预压—浸出。
1.2 体外蛋白质消化率测定 5g样品置于100ml三角烧瓶中，加入500mg胃蛋白酶(Sigma公司产品)、50ml 0.1mol/L和HCl和50mmol/LNaCl溶液，在40℃恒温摇床中保温1h。然后，用2.5ml 2.0mol/LNaOH调节pH到大约7.0；再加入20ml含0.05%叠氮钠的0.1mol/L磷酸缓冲液使pH稳定。内容物转移到预先浸泡好的透析管(Spectrum,Houston.TX.USA)，并加入含有50mg胰蛋白酶(Sigma公司产品)的缓冲液1ml，结扎好透析管，并留一定的空气于管内，以利于管内物质的混匀与透析。
为了模拟小肠环境，并使终产物的抑制作用降低到最低，胰蛋白酶的消化过程在一个消化/透析装置内进行。胰蛋白酶的消化在40℃下进行6h后，换入冰水以终止酶活。为保证移出终产物，透析管的内容物在冰水中转动透析72h。每24h换水2次。透析结束后，把残余物转入塑料容器内，冰冻干燥后，称干物质的重量，并测定粗蛋白质含量(Kjeldahl N×6.25)，每个样品至少重复3次。
1.3 肉鸡饲养试验
1.3.1 试鸡的选择和分组：1日龄的雄性肉用仔鸡购自当地的商品孵化厂，正式试验前在Jamesway式层式鸡笼内喂养3～4天。在这段时期内，肉鸡用商品开食料饲喂CP21%)。正式试验开始前，试鸡禁食4h后称重并分成5个体重组，各体重组的鸡随机分配到电热的petersime层式鸡笼的各栏内，每栏5只。试验采用完全随机设计，各栏鸡随机接受试验日粮，每组10个重复栏。
表 1 试验日粮组成(风干基础)
成 分 组 别
1 2 3
小麦(%) 56.32 57.35 59.25
卡诺拉菜粕(%) 30.00 - -
中国双低菜粕A(%) - 30.00 -
中国双低菜粕B(%) - - 30.00
大豆油(%) 5.50 5.50 5.50
酪蛋白(%) 3.90 3.60 3.89
精氨酸(%) 0.08 0.10 -
蛋氨酸(%) 0.05 - 0.01
石粉(%) 1.55 1.50 1.75
磷酸氢钙(%) 1.10 1.15 0.90
复合维生素(%) 1.00 1.00 1.00
复合矿物质(%) 0.50 0.50 0.50
三氧化二铬(%) 0.30 0.30 0.30
总和(%) 100 100 100
化学成分(计算值)
代谢能(MJ/kg) 12.78 12.77 12.77
粗蛋白(%) 21.99 21.93 22.00
赖氨酸(%) 1.09 1.03 1.10
蛋氨酸(%) 0.49 0.49 0.50
钙(%) 1.03 1.01 1.01
有效磷(%) 0.45 0.45 0.45
1.3.2 试验日粮组成：见表1。在计算配方时，根据化学分析的结果和真代谢能测定的值，使各试验日粮等能等氮。通过添加合成赖氨酸、蛋氨酸使各组赖氨酸和蛋氨酸达到NRC(1994)家禽的营养需要［4］的标准。
1.3.3 饲养管理：试验日粮以粉料形式饲喂，自由采食和饮水。持续光照，笼内温度调节到35℃，每周降低3℃。
1.3.4 称重和记录：试验鸡以周为单位称重和计料，每次称重前，所有鸡均停食4h。用体增重、饲料消耗和饲料转化率反应生产性能。
1.4 肉鸡代谢试验
1.4.1 样品收集与合并：在生长试验的日粮中，加入0.3%的三氧化二铬作指示剂。结束试验时，以栏为单位收粪2h。在试验组内，每两个栏随机合并成一个样品，每组得到5个粪样。
1.4.2 化学分析：日粮和粪样中能量、蛋白质、NDF、与纤维物质相连的蛋白质(cell wall protein)的测定按文献方法［5，6］。
1.5 统计分析 所有数据处理用SAS软件进行
2 结果与分析
2.1 体外消化 见表2。
表 2 可消化蛋白质的含量
样 品 干物质消化率(%) 可消化蛋白质(%占总蛋白质)
卡诺拉菜粕(n=3) 50.74±0.44A 73.6±0.54A
中国双低菜粕A(n=3) 43.11±0.95B 59.0±1.21B
中国双低菜粕B(n=3) 46.42±0.80B 51.0±1.05B
注：同列肩标大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)。
从表2的结果看，3个样品用胃蛋白酶和胰蛋白酶消化时，干物质和蛋白质消化率差异极显著(P<0.01)。卡诺拉菜粕中可消化蛋白质与Simbaya(1995)报道一致［5］，与 Grala等(1993)测定的加拿大商品菜粕猪回肠末端蛋白质消化率为70%［7］十分接近。而两个中国 “双低”菜粕样品都较低。在样品采集和化学评价时，已知样品A在加工受到过热损害，而样品B热处理不足［2］。过热处理时，高温对蛋白质的损害，是由于蛋白质中的赖氨酸，可能还有组氨酸和精氨酸与糖的残基，如果糖等发生迈拉德反应，形成了缩聚作用的产物［1］，而这种产物在本质上应视为日粮纤维，其证据是在120℃和126℃的温度下加工的卡诺拉菜粕中NDF含量显著增加［7］。在对样品A和B进行化学评价时，我们发现样品A中的NDF含量高达47.5%，比在实验室条件下处理的相应的脱脂粕样品(NDF含量为30.1%)增加了57.8%。表明：热损害严重影响肉鸡对蛋白质的利用率，而导致生产性能降低。?
Simbaya(1995)报道，未经热处理的卡诺拉菜粕与经90℃或100℃处理的菜粕相似，体外蛋白 质消化率均较低［5］。本试验中样品B的体外蛋白质消化率低也反映了加工过程热处 理不足。
2.2 肉鸡生长试验 从表3可见，肉鸡的各项生产性能表现出显著的差异。在各个阶段均表现出1组比2组、3组生长速度快，采食量多，饲料转化率高。试验各阶段2组的采食量均低于3组，但差异不显著(P>0.05)。2组第1周和全期生长速度均显著低于3组(P<0.05)；饲料转化率也表现出同样趋势。对样品进行化学分析时发现，样品B硫苷含量较高(48 .52umol/g脱脂干物质)，且该样品由于加工过程中热处理不足，因此仍存在一定的黑芥子酶活性(1.05单位)［2］。在两个因素的共同作用下，可能是影响3组肉鸡生产性能的重要因素。
2.3 肉鸡代谢试验 结果见表4。
从表4可见，各处理组之间，表观代谢能无显著差异(P>0.05)；但1、3组与2组氮沉积率差异显著?(P<0.05)。NDFN是与纤维物质相连的氮，其消化率1、3组极显著高于 2组(P<0.01)，1组和3组间差异不显著(P>0.05)。结果表明：尽管各样品中与NDF相联的蛋白质(NDFN)消化率均不高，但过热处理的样品A最低，仅9.89%。而这部分蛋白质的量达20.8%，占到粕样品中蛋白质含量的49.8%［2］，是导致氮沉积率低的主要和直接原因。
表 3 肉鸡生长性能
组 别 1 2 3
第1周 体增重(g) 163.6±19.9Aa 98.7±9.4Bc 123.3±10.3b
采食量(g) 230.4±29.6a 177.1±18.9b 195.9±10.4b
饲料转化率 1.41±0.13Bc 1.79±0.08Aa 1.59±0.10b
第2周 体增重(g) 283.3±23.7a 185.0±20.4b 216.6±41.6b
采食量(g) 428.5±28.8a 343.5±35.1b 349.2±25.5b
饲料转化率 1.52±0.12b 1.86±0.06a 1.67±0.38ab
全期 体增重(g) 445.9±34.1Aa 283.7±28.1Bc 339.9±39.7b
采食量(g) 658.9±47.0a 520.6±51.4b 545.0±27.1b
饲料转化率 1.48±0.08Bc 1.84±0.05Aa 1.62±0.17b
注：同行肩标小写母不同表示差异显著(P<0.05)，大写字母不同表示差异极显著(P<0.0 1)。下表同。
表 4 氮校正表观代谢能、氮沉积率和NDF氮消化率
组 别 1 2 3
表观代谢能(MJ/kg) 12.30±0.43 12.21±0.37 12.50±0.46
氮沉积率(%) 48.54±1.58a 38.38±4.21b 46.36±17.00a
NDF氮消化率(%) 33.67±4.91A 9.89±4.07B 36.19±9.45A
综上所述，体外和体内试验均表明，过热或热处理不足均导致饼粕质量的严重损害，而尤以过热损害更为严重。因此，适宜的加工温度是保证“双低”菜籽饼粕质量的关键因素。
