2 保护性抗体滴度的测定
2.1 材料
2.1.1 SPF鸡 经免疫后测得不同滴度HI抗体。
2.1.2鸭 直接从鸭场选不同HI滴度的樱桃谷鸭。
2.1.3商品蛋鸡、肉鸡 由北京市某鸡场选择不同滴度HI抗体鸡。
2.1.4 H5亚型病毒中国农业大学实验动物研究所病毒室保存。禽毒尿囊液HI为29。
2.1.5隔离器 中国农业大学实验动物研究所，SPF鸡隔离器动物房。
2.2 方法
不同HI抗体的SPF鸡、20～40日龄商品蛋鸡、肉鸡分别按＜23、24、25、26分别饲养于隔离器中。成年鸭分别按20、22～3、24～5分组饲养。通过滴鼻点眼，肌肉注射等不同方式攻毒，攻毒量0.2～0.5ml／只不等。攻毒后每日观察结果，并对死亡鸡进行剖检，攻毒8天后全部剖杀。
2.2.1 SPF鸡
试验组20只，HI抗体为26～8。肌肉注射、滴鼻点眼攻毒各10只，每鸡0.5ml。
对照组4只，HI抗体为2只，肌肉注射、滴鼻点眼攻毒各2只，每鸡0.2ml。
2.2.2 商品蛋鸡
210日龄蛋鸡组 10只。HI为 20～26。
420日龄蛋鸡组 13只。HI为 20～26，其中 23以下鸡10只，HI为23的3只。
对照组210日龄鸡、420日龄SPF鸡各4只，HI为 20。
2.2.3 商品雏鸡
16日龄商品雏鸡3组，每组9～10只，每组取2只对照，7～8只攻毒，分别命名为1～9组，2～8组，2～9组，其父母代种鸡日龄分别为529，324，270日龄。全部饲养于隔离器内。16日龄测得HI抗体效价后攻毒，每只滴鼻点眼0.2ml，2日后部分鸡剖杀，部分鸡再肌注0.2ml。首次攻毒9天后刻杀。
2.2.4 肉鸡
14只，l只HI抗体为20，其余均为26～8。经摘鼻点眼攻毒，每鸡0.5ml，攻毒后4天剖杀。
22．5樱桃谷鸭
11只，HI抗体为24～5的3只，22～3的3只，20的5只，分为3组隔离饲养，攻毒方法为每只滴鼻点眼0.4ml，肌注 0.2ml。
2.3 结果
2.3.1 SPF鸡
SPF鸡肌注对照组 攻毒后24小时鸡发呆，萎缩不动，36～48小时先后死去。剖检可见，以全身出血性变化为主，典型比亚型禽流感病变。攻毒后 4S～72小时SPF鸡滴鼻点眼对照组：鸡萎缩不动，沉郁，72～96小时死亡，刻检可见典型病变。
SPF鸡试验组 攻毒后，HI＞26，14只；HI=25，3只；HI＝24,3只。经肌肉注射和滴鼻点眼攻毒，各试验组均未见死亡，HI＝24抗体组可见肝脏有少量出血点。
2.3.2 商品蛋鸡
210日龄蛋鸡组 每只鸡滴鼻点眼0 .2ml，48小时后出现精神委顿鸡7只。48～120小时共有10只鸡发生不同程度闭目，甩头，精神委顿，至第7无供试鸡全部恢复正常。剖检可见，210日龄组，喉头出血5只，其他部位出血6只，肝脏颜色变浅或淤血，出血6只。
420日龄组 喉头出血6只，其他部位出血7只，肝脏颜色变浅或淤血、出血8只。
表3 鸭免疫后HI抗体变化（log2）
疫苗
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免后10天
|
免后15天
|
免后20天
|
免后25天
|
免后35天
|
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来源
|
均值
|
范围
|
均值
|
范围
|
均值
|
范围
|
均值
|
范围
|
均值
|
范围
|
哈兽研
|
0
|
0
|
0.8
|
0～4
|
2.8
|
2～5
|
2.8
|
0～5
|
2.8
|
2～5
|
中牧集团
|
0
|
0
|
3.6
|
3～4
|
4.4
|
3～6
|
4.4
|
3～6
|
4.4
|
3～6
|
山东1号
|
0
|
0
|
3.25
|
2～5
|
5.0
|
3～7
|
5.0
|
3～7
|
5.0
|
3～7
|
表4 攻毒前后HI抗体变化（log2）
鸡只编号
|
1～9组
|
2～8组
|
2～9组
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|||
攻毒前
|
攻毒后
|
攻毒前
|
攻毒后
|
攻毒前
|
攻毒后
|
|
1
|
1
|
死亡
|
0
|
8
|
1△
|
0△
|
2
|
2
|
6
|
0
|
6
|
2△
|
1△
|
