摘 要
作两次试验,以确定在产蛋鸡之黄霉毒素症之间,色氨酸辅助,对脂肪蓄积及产蛋率之相关。在试验1,对一完全产蛋鸡饲料、辅助两种色氨酸水准(0及2,000 ppm);基本饲料=0.16%色氨酸),及两种黄霉毒素水准(0及10 ppm)。在试验2,添加第3种黄霉毒素水准(5 ppm)於设计。在试验1及试验2,此饲料各别给与单冠白来亨鸡(58及68周龄)3周。每日测定鸡日产蛋率及蛋重,每周测定饲料摄取,在每一试验结果,测定肝重、肝水分及肝总脂肪。
在试验1,独自辅助色氨酸,与对照(没有色氨酸或黄霉毒素)相较,引起显着的总脂肪降低(P<0.01)。与单独添加黄霉素相较,添加色氨酸及黄霉毒素,会引增加总肝脂肪及引起产蛋率降低(P<0.05)。对0色氨酸:0黄霉毒素、2,000 ppm色氨酸:0黄霉毒素、0色氨酸:10黄霉毒素及2,000 ppm色氨酸:10黄霉毒素之总肝脂肪,各别为41.1、32.8、54.8及62.4%(乾基)。在试验2,发现同样之结果,结论是单独辅助色氨酸,会引起总肝脂肪降低,但当辅助於含有黄霉毒素之饲料时,色氨酸会引起关连黄霉毒素症之产蛋鸡伤害增加严重性。
一、前 言
黄霉毒素症为起因於摄取污染黄霉毒素饲料之一种严重中毒,黄霉毒素为霉菌Aspergillus flarus之主要毒性代谢物。此疾病会导致家禽产业经济性损失,主要来自降低生产,虽亦能发生高死亡率(1989 Muirhead)。黄霉毒素症导致肉鸡由於血液凝固病及毛细管胆弱(1975 Turg;1976 Derr;1982 Bababunmi及Bassir),低蛋白血症(1965 Brown及Abrams)及增加脂肪含量之增大的出血性肝的增加瘀伤(1970 Mu-ller;1970 Sims;1970 Smith及Hamilton;1970 Zytveld;1971、1972 Hamilton及Garlich;1988 Fukal)。据Tnug (1972)之报告,伤害脂肪输送,可能归因於抑制RNA合成,引起肝脂肪之显着增加(主要为甘油三脂)并减少血浆脂肪。
据最近数种研究报告,为要最大生产,色氨酸以需求量以上加入饲料,可能引起肉鸡及蛋鸡之总肝脂肪降低(1988 Akiba;1989ab Rogers及Pesti),Rogers及Pesti (1989b)表示,以1,000及2,000 ppm色氨酸辅助玉米-黄豆粉基本饲料(基本饲料之色氨酸含量=1,660 ppm)之反应,大增加血浆胆固醇、甘油三脂及非酯化脂肪。Ohtani (1989)假设,产蛋鸡之肝脂肪,对色氨酸之所见反应,可能归因於雌激素活性之可能改变。
利用鼠类之试验指出,口服处理之色氨酸,对数种肝毒性剂有抑制效果(1972 Sidransky;1973 Sarma;1982 Sidransky;1985 Sidransky)。Sidransky (1982)发现,在黄霉毒素症期间,对色氨酸之反应,会增加肝蛋白质合成,而判明色氨酸有阻止黄霉毒素之伤害效果。本研究之目的,为确定辅助色氨酸,对有严重黄霉毒素症蛋鸡的总肝脂肪之相关。
二、原料及方法
以可升铁丝网鸡笼,每笼收容1只单冠白来亨蛋鸡,作两次试验。试验1及2,开始试验时,各别为58及68周龄,任供饲料及饮水,照明时间为16小时(4点至20点)。配合基本饲料,使适合或超过产蛋鸡之NRC需求量(1984)(表1)。依照如West (1973)修正之Shotwell之方法,生产黄霉毒素(1966)。以与对照(0辅助色氨酸及0水准黄霉毒素)相较之个别预先计划之对比,分开平均数。
表一 蛋 鸡 饲 料 之 组 成
成 分 及 组 成 |
% |
碎玉米 黄豆粉(48.5%CP)石灰石粉 玉米筋料(62%CP)家禽副产物粉 去氟磷酸盐 家禽脂肪 食 盐 维生素预混物1Dl-甲硫氨酸 微量矿物质预混物 l-离氨酸 计 算 粗蛋白质,% ME,kcal/g 钙 有效P,% 甲硫氨酸+胱氨酸,% 离氨酸 测 定 色氨酸,% |
70.08 14.47 7.71 2.50 2.50 1.03 1.00 0.09 0.25 0.06 0.05 0.05 16.26 3.00 3.39 0.32 0.63 0.76 0.16 |
黄 霉毒 素(ppm) | 试 验 |
周 |
色 氨 酸 辅 助 | |||||
0 ppm |
2,000 ppm | |||||||
产 蛋 率 | 蛋 重 |
饲料摄取 |
产 蛋 率 | 蛋 重 |
饲料摄取 | |||
0
5
10 |
1
2
2
1
2 |
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 |
(%) 75.2 71.4 73.3 80.4 72.9 80.9 76.9 77.3 74.7 89.5 76.2 60.0 76.4 66.7 42.7 |
(g) 60.1 61.2 60.2 60.8 62.1 61.6 61.8 62.0 62.4 63.3 60.6 63.2 61.7 61.8 62.8 |
(g/日) 96.7 91.0 94.7 85.9 92.4 91.2 90.5 93.0 88.0 103.4 99.5 88.8 85.3 90.0 80.5 |
(%) 85.7 81.0 83.8 83.1 82.2 77.3 70.2 61.8 45.8 87.6 67.6 38.1 79.1 60.9 16.8 |
(g) 62.5 61.0 62.0 62.6 63.7 63.5 62.2 63.1 63.4 61.8 63.8 62.5 62.1 62.5 62.6 |
(g/日) 101.1 96.1 100.4 87.1 97.3 90.8 78.6 85.3 77.0 98.2 91.8 87.1 83.3 91.0 66.9 |
在所有案例,添加黄霉毒素於饲料,显着影响相对之肝大小(g肝/g体重)及肝重(表4)。辅助黄霉毒素会引起与对照群相较之肝增大。独自辅助色氨酸,没有引起与对照相较之肝大小或肝重之变化。但当与10ppm黄霉毒素组合时,会引起较大於单独黄霉毒素之较大增加。在试验1,色氨酸×黄霉毒素之交互作用显着(P=0.043)。在试验2,为近乎显着(P=0.083)。单独添加10ppm黄霉毒素时,在试验1及2增加70%及88%,而以色氨酸+10ppm黄霉毒素辅助处理,却发生97及138%之增加。
表三 对 因 变 数 之 变 异 分 析 的 显 着 值
因 变 数 | 独 立 变 异2 | |||
周 |
色 氨 酸 |
黄霉毒素 |
×色 氨 酸 | |
试验1
产 蛋 率,%
蛋 重,g 饲料摄取,g 肝 重 相对之肝大小g/100g体重 肝 水 分,g 肝 水 分,g/100g肝 肝 脂 肪,g 肝 脂 肪g/100g 肝脂肪g/100g/100乾物质 试验2 产 蛋 率,%
蛋 重,g 饲料摄取,g 肝 重,g 相对之肝大小g/100g体重 肝 水 分,g 肝 水 分,g/100g肝 肝 脂 肪,g 肝 脂 肪g/100g 肝脂肪g/100g乾物质 |
1 2 3 1~3 1~3 1~3
1 2 3 1~3 1~3 1~3 |
0.217 0.075 0.156 0.111 0.462 0.391 0.894 0.838 0.587 0.203 0.317 0.122 0.081 0.937 0.610 0.239 0.737 0.297 0.819 0.692 0.668 0.970 0.866 0.646 0.927 0.949 |
0.105 0.337 0.081 0.746 0.298 0.594 0.001 0.001 0.001 0.045 0.001 0.022 0.010 0.523 0.418 0.001 0.011 0.736 0.350 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 |
0.295 0.025 0.009 0.031 0.694 0.244 0.116 0.043 0.591 0.019 0.003 0.012 0.026 0.999 0.174 0.850 0.132 0.557 0.330 0.056 0.083 0.725 0.088 0.049 0.552 0.823 |
(1)P>F,Ho:μ1=μ2 (2)黄霉毒素表四 辅助色氨酸及黄霉毒素对肝重(g)及相对肝大小之效果(g/100g体重)(1)
黄 霉
毒 素
(ppm) |
试 验 | 辅 助 色 氨 酸 | |||
0 ppm |
2,000 ppm | ||||
肝 重 |
相对肝大小 |
肝 重 |
相对肝大小 | ||
0 5 10 |
1 2 2 1 2 |
47.5±3.7 40.5±2.2 60.1±4.7 80.6±1.8 76.3±4.4 |
2.72±0.10 2.44±0.07 3.48±0.09 4.60±0.07 4.59±0.16 |
48.2±5.4 42.1±1.9 59.0±5.1 93.5±1.6 96.2±4.8 |
2.76±0.19 2.41±0.03 3.56±0.35 5.26±0.12 5.33±0.32 |
(1)平均±SE(n=3)总肝水分类似,但逆关连肝大小(表5),在此两试验,与对照相较,黄霉毒素显着降低肝之水分%。与单独添加黄霉毒素相较,色氨酸组合黄霉毒素,甚致更显着降低水分%(试验1)。 表五 辅助色氨酸及黄霉毒素对肝水分(g及%)之效果(1)
黄 霉
毒 素
(ppm) |
试 验 | 辅 助 色 氨 酸 | |||
0 ppm |
2,000 ppm | ||||
水 分 | 水 分 | 水 分 | 水 分 | ||
0 5 10 |
1 2 2 1 2 |
(g) 29.5±1.3 27.6±1.4 36.2±2.2 47.6±2.3 44.3±1.4 |
(%) 63.4±2.7 68.7±1.4 60.7±1.1 58.4±1.8 58.6±1.5 |
(g) 28.4±1.2 28.5±1.2 37.1±2.0 48.1±0.9 53.0±3.7 |
(%) 66.8± 1.1 68.0± 0.9 61.8± 1.9 51.8±0.04 56.8± 1.5 |
(1)平均±SE(n=3)对此两试验,黄霉毒素引起显着的增加总肝脂肪之克数及相对肝重之总脂肪(g脂肪/g肝;湿或乾基)(表6)。在试验1,在色氨酸与黄霉毒素之间,对肝脂肪亦有显着之交互作用(P<0.05),且在试验2之肝脂肪克数指出,辅助色氨酸於含有黄霉毒素之饲料,与单独添加黄霉毒素相较,会增加脂肪量。在试验1,与有10ppm黄霉毒素,亦辅助色氨酸时,增加52%相较,黄霉毒素(10ppm)会引起相对肝脂肪(乾基)增加33%。在试验2,亦发现类似靶式。在试验2,在10ppm黄霉毒素水准,发现效果最大,在任一试验,没有检出体重之显着差异。 四、讨 论
本研究之结果指出,辅助色氨酸於含有黄霉毒素饲料没有缓和关连黄霉毒素症之脂肪肝,但如藉此参数所指示的,会增加中毒之严重性。此发现与Sidransky之报告(1982)相反,他们自老鼠生物化学资料,判明色氨酸似乎有抑制肝组织之黄霉毒素的效果。此差异可能是由於动物种类,管理经路或关连色氨酸辅助之蛋白质合成增加之判明,没有指出关连黄霉毒素症之逆效果。
表六 辅助色氨酸及黄霉毒素对肝脂肪克数及肝脂肪%(湿及乾基)之效果(1)
黄 霉
毒 素
(ppm) |
试 验 | 辅 助 色 氨 酸 | |||||
0 ppm |
2,000 ppm | ||||||
总脂肪 | 肝脂肪2 | 肝脂肪3 | 总脂肪 | 肝脂肪1 | 肝脂肪2 | ||
0 5 10 |
1 2 2 1 2 |
( g ) 7.5±1.8 3.9±0.6 12.1±1.7 18.5±1.8 17.5±2.2 |
(%) 15.7±4.1 9.6±1.3 20.1±1.3 23.0±3.0 23.0±1.7 |
(%) 41.1±5.0 29.8±2.4 50.7±1.9 54.8±2.8 55.0±2.0 |
( g ) 5.4±0.6 3.9±0.5 12.4±2.1 28.2±0.7 24.0±1.5 |
(%) 11.2±0.8 9.4±1.4 21.1±2.1 30.2±0.4 24.9±0.3 |
(%) 32.8±1.2 29.2±3.3 51.7±2.4 62.4±0.7 56.1±3.4 |
(1)平均±SE(n=3) (2)湿基 (3)乾基此地所报告之黄霉毒素对产蛋率之一般效果,与先前之产蛋鸡的报告一致(1970 Sims;1971 Hamilton及Garlich;1972 Tung)。始终伴随饲料摄取降低之产蛋率降低,为典型之黄霉毒素症之证明。独自辅助色氨酸,对产蛋率之效果,类似Rogers及Pesti (1989b)之报告,但不类似Ohtani之报告,他们指出当添加辅助之色氨酸於饲料时,会增加鸡日产蛋率。色氨酸显然会增加黄霉毒素症之严重性,此点不能归因於单纯之氨基酸不平衡,因独自辅助色氨酸,没有降低产蛋率,且在某案例,会略改善效能。蛋重亦没有受添加2,000 ppm色氨酸於饲料之影响。Rogers及Pesti (1989b)先前之报告指出,高到3,000 ppm之色氨酸辅助水准,对产蛋率特性没有负效果,只有4,000 ppm才有略降低产蛋率。 肝脂肪反应类似产蛋率,独自之黄霉毒素会产生肝脂肪增加。比对照,独自之色氨酸辅助,会显着降低总肝脂肪,此点证实先前之产蛋鸡的结果(1989b Rogers及Pesti),但当添加色氨酸辅助於含有黄霉毒素之饲料时,发现比单独之黄霉毒素更增加。 在家禽,黄霉毒素被肝之混合功能氧化鶤系统代谢,主要代谢产物为黄霉毒素B1及其他较少毒性之水解衍生物,然後这些代谢产物共轭促进此代谢物之固有毒性之降低,并增加排泄速率。本研究曾证实,一种高毒性代谢物之黄霉毒素B1-di-hydrodiol之产物,有结合巨大分子(例如核酸)之能力,此代谢物最可能自黄霉毒B1-2,3-epoxide之水化形成。因此色氨酸可能会抑制这些反应或使黄霉毒素转成其epoxide或水化型,这将扮演一较大之毒性效果。这点似乎与指出含有iudole之化合物,会增加微粒体之混合功能氧化鶤之活性报告(1978 Watten berg)对比。这仍然说明饲料色氨酸是否增加混合功能氨化鶤活性,尤其在鸟种类。
判明色氨酸不能缓和蛋鸡之黄霉毒素症之不利效果,但似乎会升高此疾病之严重性。与单独之黄霉毒素相较,添加色氨酸於有黄霉毒素之饲料,会增加总肝脂肪及肝大小,降低水分%,并降低产蛋率。色氨酸与黄霉毒素连合,导致之伤害严重性增加,其机构不明。当发生敏感性增加时,蛋鸡可能是在这些条件,适合於研究关连黄霉毒素或色氨酸之毒性效果的模式。