关键词 生豆粕；胰蛋白酶抑制剂；混合发酵
豆粕是畜禽最重要的植物性蛋白源，其中粗蛋白含量高达43％～48％，并有较平衡的氨基酸组成，尤其是其它植物性饲料易缺的赖氨酸，其含量高达2.5%~2.8%[1]。但是，豆粕中还存在多种抗营养因子，极大地影响了豆粕的饲用价值。胰蛋白酶抑制剂（Trypsin Inhibitors；简称TI）是豆粕中主要的抗营养因子，在豆粕中的含量为2%左右[2]。TI能阻碍肠道内蛋白水解酶的作用而使蛋白质消化率下降，引起恶心、呕吐等肠胃中毒症状；另一方面TI还作用于胰腺本身，刺激胰腺分泌过多的胰腺酶，造成蛋白质内源代谢损失，导致动物出现消化吸收功能失调或紊乱，抑制了机体的生长[4]；另外，由于胰脏大量地制造胰蛋白酶，可造成胰脏肿大中毒等现象[5]。
热处理生豆粕可以有效地破坏TI分子结构，但是，热加工处理工艺复杂，能源消耗大，而且加热不够，不能消除抗营养因子，加热过度则会破坏饲料中的氨基酸和维生素，加热过程还会引起氨基酸与碳水化合物反应，如赖氨酸与还原糖反应生成不溶性复合物，导致蛋白质消化率下降，降低饲料的营养价值，影响豆粕的利用率。
本文采用多菌种混合发酵法处理生豆粕，研究其最佳发酵工艺，以达到在不影响豆粕营养价值的情况下钝化去除TI的目的。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 菌种
酵母菌y-021，y-028，乳酸菌Lc均为本实验室筛选菌种。
1.1.2 培养基
种子培养基，麦芽汁培养基[6]。发酵基础培养基，豆粕45g/500ml广口瓶，料水比1：1，pH值自然。
1.2 方法
1.2.1 种子培养方法
将斜面菌种分别接一环于液体种子培养基中，于25℃，220r/min培养24h。
1.2.2 不同条件对豆粕发酵的影响
在发酵基础培养基的基础上，通过改变不同的发酵条件进行试验。
1.2.2.1 多菌株不同接种量对豆粕发酵的影响 采取酵母菌y-021，y-028，乳酸菌Lc3种菌混合发酵，进行各菌株不同接种量的正交试验。
1.2.2.2 含水量对豆粕发酵的影响 进行豆粕不同含水量试验，料水比分别为1：0.5，1：0.6，1：0.7，1：0.8，1：0.9，1：1.0，1：1.1，1：1.2，1：1.3。
1.2.2.3 通气量对豆粕发酵的影响 通气量通过不同的瓶装量来调节，500ml广口瓶装量分别为（干料重）15g，30g，45g，60g，90g。
1.2.2.4 发酵时间对豆粕发酵的影响 进行豆粕不同发酵周期的试验，发酵周期分别为36h，48h，60h，72h，84h。
1.2.2.5 pH值对豆粕发酵的影响 用缓冲液把培养基起始pH值分别调为2.3，4.6，7.0，9.0及pH值自然（自来水）。
1.2.2.6 起始温度对豆粕发酵的影响 发酵温度分别为20℃，25℃，30℃，35℃，40℃。
1.2.3 测定方法
豆粕中胰蛋白酶抑制剂含量的测定，改进的PAPNA法[7]。
2 结果与分析
2.1 发酵条件试验
2.1.1 不同接种量对去除豆粕中TI的影响
接种量是与培养基利用率直接相关的参数。大的接种量尽管可以使生长快、周期短，但后期可能因缺乏营养而无法实现高的芽孢数；而接种量太少不仅对营养利用不充分，且发酵周期可能延长，染菌机率提高[8～9]。采用酵母菌y-021，y-028，乳酸菌Lc3种菌混合发酵，通过正交实验进行了不同接种量对去除TI的影响，结果如表1所示：3种菌对TI的分解效果，影响最大的为酵母菌y-021，其次是酵母菌y-028、乳酸菌Lc菌。所以要较好地分解胰蛋白酶抑制剂，需酵母菌y-021 4％、y-028 2％、Lc菌2％。
2.1.2 含水量对去除豆粕中TI的影响
与液体深层发酵不同，固体发酵的培养基含水量是一个很重要的参数，包被在固体基质表面的水膜溶解了微生物需要的无机盐和代谢产物,同时为微生物的生长提供所需的潮湿环境。另外,基质含水量还影响着培养系统中的氧气供应、气体流动等[10],它是关系到发酵成败的制约因素。不同含水量试验结果如图1所示：料水比为1：1～1：1.3的发酵对胰蛋白酶抑制剂的分解效果均较好。从实际生产考虑，选1：1作为最佳发酵料水比。
2.1.3 通气量对去除豆粕中TI的影响
通气量对豆粕中TI的去除有一定的影响，结果见图2。500ml广口瓶中干料装量为60g时，对豆粕中TI的分解效果最好。
2.1.4 发酵时间对去除豆粕中TI的影响
2.1.6 不同起始pH值对豆粕中胰蛋白酶抑制剂含量的影响
培养基的酸度对微生物的生命活动有很大影响，酸度过高或过低会影响微生物的新陈代谢正常进行。pH值可以影响细胞膜上的电荷，从而影响微生物对营养物质的吸收[11]。发酵基质不同的起始pH值对豆粕中TI的处理效果见图5，pH值为自然（自来水）时，对豆粕中TI的去除效果最佳。 3 结论 参考文献（略） |
