随着人类对抗生素作用认识的不断深入,对于抗生素可能导致的动物体耐药性的产生及药物残留越来越引起人们的关注。因此,许多国家相继颁布法令,限制抗生素在饲料中的使用。而绿色微生态添加剂逐渐成为热点。大量研究表明,甘露寡糖在动物体内促进肠道有益菌的增殖,减少肠道病原菌,提高肠道黏膜的完整性,调节动物免疫反应从而提高动物的生产性能。本实验旨在研究甘露寡糖对断奶仔猪肠道菌群的影响,为甘露寡糖在仔猪饲料中的科学应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组
选取健康的28日龄断奶三元[杜×(大×长)] 杂交仔猪96头,按体重相近,公母各半的原则分为4个处理组,每个处理组3个重复,每个重复8头仔猪。各组初始体重无明显差异,平均体重为(7.46±0.38)kg。
1.2 实验饲粮及实验设计
实验用的酵母甘露寡糖由北京奥特奇生物有限公司提供。实验用的基础日粮参照NRC(1998)10-20Kg体重仔猪的营养标准配制,由沈阳众友饲料有限公司提供。
实验按照单因素4处理3重复随机设计实验,实验从28日龄断奶开始,为期28 d(4周);实验分4组进行:即各组基础日粮相同,第1组为对照组,不添加甘露寡糖。第2组至第4组在断奶仔猪的基础日粮中分别添加0.1%、0.2%和0.4%的甘露寡糖。
1.3 饲养管理
本实验在沈阳农业大学科研猪场进行。实验仔猪饲养于封闭、半漏缝地板式猪舍,每个重复仔猪饲养于一栏,自由采食、饮水。按照常规饲养和免疫程序进行饲养管理,实验期间腹泻仔猪不用药物治疗。
1.4 测定指标及方法
实验最后一天,每个重复随机抽取1头体重适中的健康仔猪进行屠宰,立即剖腹,取结肠、盲肠和直肠一段,检测各肠段 内容物中大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌的浓度。
1.5 统计分析
用SAS(6.12版本)统计软件对全部数据进行处理和统计分析。菌落取Log10对数后进行统计分析。
2 结果与分析
由表1可知,不同甘露寡糖添加量都极其显著抑制结肠、盲肠和直肠中大肠杆菌的增殖,0.2%的甘露寡糖添加量效果最好。第3组、第4组的结肠、盲肠和直肠中双歧杆菌浓度显著高于对照组。第2组的结肠中双歧杆菌增殖显著,但盲肠和直肠中双歧杆菌的增殖效果与对照组相比差异不显著。第2组直肠中乳酸杆菌浓度显著高于对照组,第3组盲肠中乳酸杆菌浓度显著高于对照组,而各个实验组在结肠中乳酸杆菌浓度与对照组相比差异不显著。
表1 不同浓度甘露寡糖对断奶仔猪肠道菌群的影响
第1组(对照组) 第2组(0.1%甘露寡糖) 第3组(0.2%甘露寡糖) 第4组(0.4%甘露寡糖)
大肠杆菌Escherichia.coli
结肠 7.02±0.03A 6.81±0.02B 6.04±0.01B 6.15±0.06B
盲肠 7.10±0.21A 6.43±0.06B 6.11±0.04B 6.20±0.10B
直肠 7.08±0.04A 6.64±0.08B 6.23±0.11B 6.32±0.17B
双歧杆菌Bifidobacterium
结肠 8.71±0.04a 9.04±0.06b 9.24±0.09b 8.92±0.08b
盲肠 8.24±0.11a 8.20±0.05a 9.05±0.08b 8.48±0.03b
直肠 8.64±0.03a 8.79±0.12a 9.44±0.10b 8.81±0.05b
乳酸杆菌Lactic bacteria
结肠 8.31±0.22 8.27±0.09 8.38±0.04 8.44±0.12
盲肠 8.04±0.05a 8.21±0.03a 8.87±0.11b 8.11±0.07a
直肠 8.46±0.03a 9.12±0.06b 8.67±0.21a 8.34±0.12a
1、 Log10efn/g:每克肠内容物含菌落数的对数值。
2、 同行数据肩标完全不同表示差异显著。大写字母不同者为差异极显著(P<0.01). 小写字母不同者为差异显著(P<0.05).
3 讨论
目前直接研究甘露寡糖调节动物肠道微生态系统的文献不是很多。Sisak(1994)报道鸡饲料中添加0.1%的甘露寡糖可减少盲肠、肝、脾中沙门氏菌。Schoeni和 Wong(1994)也指出,用甘露寡糖饲喂肉仔鸡降低了金黄色葡萄球菌在其肠道中的定植。体外实验还表明:粘连在上皮细胞上的大肠杆菌碰到甘露寡糖后可在30 min内脱落下来,或者由于病原菌与甘露寡糖结合后无法利用其提供的营养而饥饿死亡。Fernadez等研究发现,在母鸡日粮中添加甘露寡糖能提高母鸡盲肠内容物中双歧杆菌数。本次实验结果表明,添加甘露寡糖能显著降低仔猪各肠段的大肠杆菌的浓度。而且在同样的条件下培养大肠杆菌时,对照组的培养基上还生长了其它一些有害菌,实验组没有出现这种情况,这可以进一步说明甘露寡糖具有抑制有害菌的作用。添加0.2%和0.4%的甘露寡糖能显著增强仔猪各肠道的双歧杆菌的浓度,而添加0.15%的甘露寡糖只能显著增强仔猪结肠中的双歧杆菌的浓度。本实验中甘露寡糖对乳酸杆菌的增殖作用在不同肠段表现存在差异。具体原因还不是十分清楚。这也提示我们应更加深入地研究其反应机理,以期更好地利用甘露寡糖这一新型绿色微生态添加剂。