摘要:本研究采用Sibbald强饲快速法,应用去盲肠手术公鸡,测定并比较了不同纤维素水平下的内源氨基酸排泄量。结果表明,随着日粮中纤维素含量的增加,鸡对纤维素的消化率下降;去盲肠后,低纤维素的消化率降低,而对高纤维日粮的纤维素消化率无影响,去盲肠对低纤维日粮中纤维素消化率影响较大。由此说明,内源排泄量的多少取决于日粮纤维素水平,内源排泄量的测定及校正应采用一定水平的纤维素日粮。?
关键词:纤维素;内源氨基酸排泄量;去盲肠公鸡
内源分泌量的测定是氨基酸代谢率测定中争论最多的问题,很多因素诸如:试验动物、饲料类型、环境温度盲肠微生物、排泄物收集时间等都会影响内源氨基分泌量。最新的研究表明,其主要的因素是纤维和蛋白质,即日粮组成对内源排泄量有影响。为避免上述问题的发生,最好的办法是使用标准化的测定技术,但目前尚为见到有关内源排泄量测定方法的技术规范和明确标准。
1 材料与方法?
1.1 试验动物?
采用36周龄健康的星杂579公鸡6羽,按体重分为两组,每组3羽,于代谢笼中单个饲养,自由饮水,其中一组公鸡在26周龄切除盲肠。术后试鸡恢复4周,于试验前2周在肛门处缝合一个100ml塑料瓶盖,以便试验期内收集试鸡的排泄物。?
1.2 去盲肠手术?
术前对试鸡饥饿24h,仰卧保定,拔掉腹部龙骨至泄殖腔偏左处4×4cm?2左右范围的鸡毛,经消毒后在龙骨下端切开皮肤约3cm,分离皮下脂肪组织和腹肌,暴露出肌胃和十二指肠,将两条盲肠拉出腹腔,剪断盲肠,荷包缝合,消毒后按50万单位/羽注入青霉素和链霉素,同时饮喂ORS口服液和多维葡萄糖。?
1.3 试验方法?
试验采用改良的Sibbald“TME”法,将3羽鸡去盲肠,并将6羽鸡分为两组,每次测定一个样品,试验程序为:禁食48h→强饲30g被测饲料→收集 48h排泄物→喂基础日粮4d→做下一次试验,把每羽鸡收集的排泄物在65℃鼓风烘箱中烘干,回潮24h后称重,每羽鸡的排泄物粉碎制成一个样品供分析氨基酸等。?
1.4 试验日粮?
试验日粮分基础日粮和纤维日粮(由豌豆淀粉和纤维素组成)两种,按纤维素含量分为5种,即N、N1、N2、N3、N4,其纤维素含量分别为0、3%、5%、8%、11%。?
1.5 样品分析?
氨基酸含量用日立835-50型高速氨基酸自动分析仪分析。?
1.6 结果计算和统计分析方法?
各组内源氨基酸排泄量用平均的标准差表示。
2 结果与分析?
2.1 纤维素水平的影响?
不同纤维素水平下的内源氨基酸排泄量结果见表1。?
表1不同纤维素水平内源氨基酸排泄量(mg/48h)
成分 | N | N1 | N2 | N3 | N4 | |||||
正常 | 去盲肠 | 正常 | 去盲肠 | 正常 | 去盲肠 | 正常 | 去盲肠 | 正常 | 去盲肠 | |
ASP | 66.40±13.27 | 60.17±15.27 | 53.20±3. 4 0 | 56.77±13.80 | 55.77±4.66 | 58.07±4.99 | 47.93±6.55 | 48.33±10.96 | 56.57±17.27 | 57.13±9.92 |
THR | 43.17±10.17 | 48.43±9.31 | 32.30±4.60 | 40.50±10.24 | 36.77±9.70 | 44.13±2.93 | 32.83±2.35 | 35.47±7.25 | 35.50±8.85 | 43. 23±9.25 |
SER | 35.30±8.92 | 35.73±7.73 | 26.60±3.60 | 33.53±9.00 | 35.53±10.28 | 35.00±2.25 | 24.73±4.15 | 28.77±5.40 | 30.67±6.64 | 35.23±5.97 |
GLU | 86.83±14.23 | 74.10±15.60 | 73.70±4.40 | 78.47±19.01 | 78.47±19.81 | 79.50±3.90 | 64.93±9.55 | 66.63±11.88 | 79.57±21.39 | 76.60 ±9.90 |
GLY | 129.40±7.86 | 152.93±35.34 | 135.50±7.20 | 203.30±86.23 | 1 04.87±34.53 | 148.30±85.28 | 96.93±27.28 | 126.23±47.68 | 150.53±10.71 | 126.07±28.15 |
ALA | 42.23±5.42 | 37.37±8.60 | 39.60±3.70 | 38.87±10.26 | 39.63±10.30 | 39.00±2.14 | 31.73±5.40 | 32.23±6.25 | 38.17±12.48 | 37.33±7 .11 |
VAL | 49.40±9.44 | 49.93±12.91 | 42.47±4.27 | 49.20±13.64 | 48.33±12.09 | 51.60±5.10 | 39.07±4.20 | 41.13±9.00 | 42.60±10.06 | 46.43±8.79 |
MET | 23.67±3.84 | 33.20±3.90 | 15.37±2.40 | 23.47±7.13 | 21.73±1.72 | 28.10±7.02 | 21.70±1.41 | 25.33±6.92 | 22.37±2.47 | 28.27±10.00 |
ILE | 32.13±6.99 | 28.30±6.09 | 27.77±1.72 | 28.77±7.90 | 29.33±7.99 | 28.27±1.40 | 22.07±4.20 | 22.33±4.52 | 26.30±8.88 | 28.60±5.51 |
LEU | 49.27±11.90 | 44.30±10.17 | 39.60±3.66 | 40.70±12.10 | 41.8 3±12.46 | 40.87±3.70 | 31.33±5.96 | 33.23±7.00 | 39.47±14.32 | 42.80±7.47 |
TYR | 26.97±6.81 | 26.33±6.77 | 24.90±2.07 | 26.17±8.26 | 23.97±7.80 | 22.70±3.95 | 17.07±3.14 | 18.10±5.05 | 21.50±7.74 | 24.17±4.32 |
PHE | 36.53±10.12 | 32.93±7.48 | 30.00±2.29 | 34.23±10.21 | 35.03±7.65 | 33.83±4.07 | 28.27±5.01 | 31.00±6.16 | 34.27±7.77 | 34.23±3.3 4 |
LYS | 40.00±8.35 | 34.33±8.50 | 36.17±2.80 | 47.20±20.70 | 37.97±8.25 | 48.27±13.79 | 29.80±3.68 | 34.30±10.05 | 35.07±8.46 | 33.90±3 .77 |
HIS | 9.47±2.37 | 9.03±2.68 | 6.73±1.26 | 8.60±2.95 | 6.17±0.45 | 9.00±2.35 | 5.43±0.61 | 7.53±2.29 | 7.53±1.65 | 9.60±3.41 |
ARG | 29.17±7.22 | 21.63±4.76 | 24.90±2.07 | 33.50±14.53 | 25.33±8.57 | 28.83±5.43 | 18.97±4.86 | 21.93±4.75 | 25.87±7.57 | 24.10±2.91 |
PRO | 32.80±6.41 | 34.80±6.22 | 27.20±4.87 | 33.17±7.56 | 34.83±12.13 | 35.37±2.65 | 25.53±1.97 | 27.87±2.73 | 30.13±5.40 | 31.57±4.58 |
CYS | 32.60±4.24 | 36.50±11.07 | 22.00±1.47 | 28.80±7.72 | 27.33 ±12.12 | 24.17±2.97 | 29.00±2.36 | 31.10±10.24 | 33.70±4.65 | 33.90±3.77 |
ΣAA | 752.01 | 765.70 | 665.61 | 805.33 | 682.92 | 747.09 | 567.42 | 631.51 | 709.82 | 713.24 |
注:各组内源氨基酸值均为风干样中含量?
2.2 试验期的延长对内源排泄量的影响?
本次试验安排的代谢试验程序为:N1→N2→N3→N4→N。从内源氨基酸排泄量测定结果看出,随代谢试验期的延长,越到后期未去盲肠鸡内源氨基酸排泄量越高,第一期内源总氨基酸排泄量为:665.61mg/48h,最后一期为:765.70mg/48h;但去盲肠鸡则不呈现规律,第一期为:805.33mg/48h,最后一期为:752.81mg/48h。
3 讨论?
3.1 内源排泄量测定方法的应用?
Sibbald(1979)提出的用饥饿法测“TME”值,虽具有测试时间短,不受试验家禽的性别、种类、年龄以及采食量等因素的影响的优点,但未考虑不同饲料在家禽体内通过的时间的不一致性,而且这些因素直接影响内源排泄物的数量和质量,Farrell(1982)虽提出不同看法,并根据其理论提出新方法,但其论点仍未解决如何排除内源排泄物对代谢物质的干扰问题。Parsons等(1983)的研究结果显示,无氮日粮的实际组成会影响内源氨基酸的排泄,因为从最基本的生理角度讲,饲喂无蛋白日粮都要比长期禁食好得多。内源排泄量可能是不同饲料的固有特点,因此,利用禁食或无氮日粮测得的内源排泄量来校正某待测饲料的真消化率显然不适合,内源排泄量取决于日粮纤维水平。?
3.2纤维日粮对消化代谢率的影响?
影响内源排泄量的因素很多,其主要因素是纤维和蛋白质,Halnan(1949),Anderson等(1958)的早期研究表明,盲肠对纤维类物质的消化作用很小,而Gasaway(1976),Duke等(1984)通过对采食高纤维日粮的野生禽属动物和家养鸟的观察表明,盲肠内存在微生物对纤维素的发酵作用,并且所产生的VFA可以通过盲肠细胞吸收进入体内。Parsons等(1983)发现,饲用由淀粉和纤维素组成的高纤维纯化日粮时,内源氨基酸的排泄量显著增加,Raharjo等(1984a)及Green(1988)亦指出并证实内源氨基酸排泄量随日粮纤维含量的增加而增加,但其并不是内源与分泌增加的结果,而是未消化氨基酸排泄量增加所致,并且还发现日粮中纤维素达12%时,内源氨基酸尚未增加。本试验的结果与这一论点极为相近。
?3.3 其它因素的影响?
由于鸡对饲料的适应期有时长达1个月,所以每期代谢试验的间隔时间长短很重要。本次试验间隔时间为3~4天,禁食时间为48h,所以对试鸡应激较大,从测定结果也发现,越是后期未去盲肠鸡内源性总氨基酸量越高,而且发现,去盲肠与否对内源排泄量影响较大,影响其因素较复杂,有待进一步探讨。?
4 结论?
从本研究对不同纤维素水平下内源氨基酸排泄量的测定结果可知,去盲肠鸡比未去盲肠鸡的内源氨基酸排泄量高,并且在低纤维日粮下(3~5%),内源氨基酸的排泄量随纤维含量的增加而降低;在高纤维日粮下(8~11%),内源氨基酸的排泄量有所提高,表明纤维素含量的高低可影响内源氨基酸的排泄量,利用一定水平的纤维日粮进行内源氨基酸的测定来校正代谢率,可以排除内源对被测饲料物质的影响。本次研究还发现试验期和过渡期长短也会影响内源氨基酸的排泄量。?
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参考文献略