测定多维预混合饲料中的维生素E有多种的方法。最常用的方法一般会使用将样品进行皂化，然后用溶剂进行萃取，挥发溶剂后再进行稀释，配制到一定的浓度，再进行HPLC的分析。
我们先来讨论一下皂化的作用。皂化是一种化学反应，是酯类化合物和强碱反应，生成醇和酸的反应，生成的酸再和强碱反应生成盐和水。在饲料的分析中不是利用反应的生成物，而是有以下的作用：
对于用明胶包膜的维生素组分，可以打开明胶包膜，使内容物溶出。
对于脂溶性维生素，通过萃取可以去除一部分杂质。
可以在分析低含量脂溶性维生素样品时，浓缩组分。
从上面的论述中我们可以了解到，皂化反应在分析维生素E组分时，可以起去除一部分杂质，在分析低含量样品时可以起到浓缩组分的作用。在进行皂化反应和萃取的过程中，操作的难度较高，影响准确度的因素很多，如果操作者不熟练的话，则会得到偏低的结果，甚至测不出维生素E来。因为维生素E醋酸酯经皂化后会变成生育酚，而酚羟基从理论上说是带有酸性的，极易破坏。所以化验员要进行反复的练习后，并经过回收率的测试后，才能进行样品的分析操作。对于多维预混合饲料中的维生素E，一般来说含量比较高，杂质的干扰也可以忽略。因此，下面推荐一种直接萃取的方法来进行分析，操作简单准确度很高;
多维预混料中维生素E醋酸酯的测定
试验方法
除特别注明外，试验中所用试剂均为分析纯，水为相应纯度的水，溶液为水溶液，试验仪器为一般实验室设备。
试剂和溶液：
甲醇（HPLC级）
甲醇
维生素E醋酸酯对照品
标准溶液的制备：
称取维生素E醋酸酯对照品约100mg （准确到0.0001g）, 置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀后再精密吸取10.00mL 置于另一100mL 棕色容量瓶中，用甲醇定容。浓度约为100μg/mL。
维生素预混料样品溶液的制备：
称取预混料约1g (精确到0.0001g)于100mL的容量瓶中，加入甲醇约70mL，置于50℃超声波水浴中处理20 min，冷至室温后用甲醇定容，充分摇匀。再取部分溶液用甲醇进行稀释，最终浓度约在50 ~ 120μg/mL，取部分溶液离心，上层清液通过0.45 μm滤膜过滤后，用于HPLC测定。
进样：
将标准溶液和试样溶液各50μL依次注入仪器进行分析。（进样量可以根据不同的仪器自行调整）
色谱条件
色谱柱：Lichrospher 100 RP-8, C8, 5μm, 250mm × 4.0mm
流动相： 甲醇 （HPLC级）
流速： 1.0 mL/min
进样量： 50 μL
检测波长： 285nm
运行时间： 约7min
分析结果的计算：
样品中所含维生素E(mg/g)的效价可依照下式计算：
Cst × Wst × As × ns
维生素E =__________________________
W × Ast ×nst
式中：Cst — 维生素E对照品的含量，%；
Wst — 维生素E对照品的质量，m g；
Ast — 维生素E对照品的峰面积；
As — 样品溶液的维生素E峰面积；
nst — 维生素E标准溶液的稀释倍数；
ns — 样品溶液的稀释倍数；
W — 样品的质量，g。
注：如果样品中杂质太多，在高效液相色谱中与维生素E分离不完全，则应采用皂化的分析方法进行分析。
使用直接萃取的本方法进行多维预混料中维生素E醋酸酯的分析，其回收率可以高达95％以上，准确度非常的高。
多维预混料中测定维生素B2的准确性
本文讨论在多维预混料中测定维生素B2的准确性的问题。
在谈论正题之前，先谈一下有关的概念问题。一般我们在化验样品的时候至少要一式二份，测定平行数据然后取平均值。这是一个测定的精密度的问题。我们说有时候二份测定的平行数据很好，相对偏差很小，那么是否就是分析的结果就是很准确呢？举个例子来说：如果射五支箭，全部射在箭靶的边缘的一点上，虽然远离靶心，可是却射在一个点上。我们说这是精密度很好，但却准确度不高。就像我们做分析数据，平行数据很好，亦就是说虽然精密度很好，但是离开真实的数据却偏离很多。如果五支箭射在红心周围的一定的区域内，虽然相互之间存在一定的偏差，但是它的平均值就比较的接近准确数据。那麽如何来解决这个问题呢？这就引出一个测定方法的回收率的问题。因为，分析预混合饲料产品不同于分析单一的组分，例如：单一的维生素原料或单一的药品等。因为预混合饲料中有很多组分，也存在许多杂质，有些甚至对测定会有干扰。我们说要把样品先进行预处理，要把我们要测定的组分完全的分离出来，消除干扰的因素，然后才能进行有效的分析。把需要的组分完全的从样品中分离出来，是提高回收率的最重要的因素。当然，我们希望对需分析的目标组分的回收率最好是达到100％的完全分离出来，但是组分的回收率还会受到其他好多因素的影响，在这里就不作讨论了。对于本文的主题，在多维预混料中测定维生素B2来说，影响测定准确度的最大的因素就是萃取回收率的问题。
我们最常用的分离方法之一就是把目标组分用溶剂从样品中萃取出来，对于维生素B2组分来说也是如此。先精密称取一定量的样品，然后加入萃取液，放在超声波水浴中处理，进行萃取。最后根据浓度进行稀释、过滤、进样进行PHLC分析。在这个过程中，我们要知道关键的所在。这就是所谓的要知其然而知其所以然。对于维生素B2我们最常用的萃取液是用蒸馏水配制的。而维生素B2在水溶液中的溶解度是有限的，在一般情况下每100毫升的萃取液只能溶出7毫克的维生素B2（对于不同方法配制的萃取液，可能萃取率不一样，可以用实验来确定）。因此我们在进行第一次萃取的时候，就是要考虑这个问题。由于各种配方中所含的量是不一样的，我们既要考虑取样量的代表性，又要考虑到所含维生素B2的量。比如说：如果一个配方中含维生素B2为30g/kg，那么称取一克样品的话，其中就包含了30mg的维生素B2。那么我们首次萃取就应该用500ml的容量瓶，先放入450ml左右的萃取液，置于超声波水浴中进行萃取，然后再稀释到刻度。再如，如果一个配方中含有维生素B2 的量为10g/kg，那么称取一克样品时，其中包含了10mg的维生素B2。我们就可以第一次用150ml的容量瓶来进行萃取工作。只有这样才能得到准确的分析结果，当然我们也可以调节称量来控制萃取的量。
对于化验不知含量的配方，我们只做一次分析的话，就有可能会得出不准确的结论。所以我们要进行至少两次不同浓度的萃取过程才能得到准确的分析结果。这是一个很简单的道理，但是如果忽略了这个问题，就会得出很糟糕的分析结果。
对于回收率的影响因素有很多，我们将会在以后的讨论中一一加以论述。
关于斑蟊黄制剂制假或掺假的简易识别
斑蟊黄的学名是：ββ-胡萝卜-4,4-二酮，这是众多类胡萝卜素中的一种。在常用的饲料配方中经常会用到一些斑蟊黄的制剂作为着色添加剂，尤其是禽类的饲料配方。常用的产品有：罗氏的加丽红、BASF的露康定红和新和成公司的和成红等斑蟊黄的产品。
由于斑蟊黄制品生产厂家比较少，而用途比较广，因此有一段时间市面上出售的斑蟊黄制剂造假很厉害。由于一般的客户缺少有效的分析仪器，很难一下子识别出来。开始是100％的假货，这样用定性的方法就可以鉴别出来。后来造假者使用掺假的手段，在10％的斑蟊黄制剂中掺入20％左右的假货。这样用一般的定性的方法是识别不出来的。因为其中还是含有8％左右的斑蟊黄，使用时也有一点效果。造假者就是通过这样的手段来获取不正当的利润。
基于假的斑蟊黄制剂的性状完全不同于真的斑蟊黄制剂的外形，因此我们推荐一种用普通的立体显微镜观察的方法来识别。见下面的照片：
我们可以从两张照片中看到两种不同形状的制剂。前一种是造假者用一种盐类的东西掺入红粉，如果用肉眼观察是一种深红色的颗粒状粉剂，和真品一摸一样，难以分别，在显微镜下就是不规则的白色颗粒外面包裹了红粉。而第二张照片是真正的斑蟊黄制剂，红色的球状颗粒，外面的白色的是制造时的副料，如淀粉等。
这一张照片中，就掺有占总含量20％的假货。可以看到，在红色的斑蟊黄颗粒中掺有白色的涂有红粉的盐块。因此，用显微镜观察这个简单的方法就能识别斑蟊黄制剂中是否有制假或掺假的现象。
