我们先来讨论一下皂化的作用。皂化是一种化学反应，是酯类化合物和强碱反应，生成醇和酸的反应，生成的酸再和强碱反应生成盐和水。在饲料的分析中不是利用反应的生成物，而是有以下的作用：
对于用明胶包膜的维生素组分，可以打开明胶包膜，使内容物溶出。
对于脂溶性维生素，通过萃取可以去除一部分杂质。
可以在分析低含量脂溶性维生素样品时，浓缩组分。
从上面的论述中我们可以了解到，皂化反应在分析维生素E组分时，可以起去除一部分杂质，在分析低含量样品时可以起到浓缩组分的作用。在进行皂化反应和萃取的过程中，操作的难度较高，影响准确度的因素很多，如果操作者不熟练的话，则会得到偏低的结果，甚至测不出维生素E来。因为维生素E醋酸酯经皂化后会变成生育酚，而酚羟基从理论上说是带有酸性的，极易破坏。所以化验员要进行反复的练习后，并经过回收率的测试后，才能进行样品的分析操作。对于多维预混合饲料中的维生素E，一般来说含量比较高，杂质的干扰也可以忽略。因此，下面推荐一种直接萃取的方法来进行分析，操作简单准确度很高;
多维预混料中维生素E醋酸酯的测定
试验方法
除特别注明外，试验中所用试剂均为分析纯，水为相应纯度的水，溶液为水溶液，试验仪器为一般实验室设备。
试剂和溶液：
甲醇（HPLC级）
甲醇
维生素E醋酸酯对照品
标准溶液的制备：
称取维生素E醋酸酯对照品约100mg （准确到0.0001g）, 置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀后再精密吸取10.00mL 置于另一100mL 棕色容量瓶中，用甲醇定容。浓度约为100μg/mL。
维生素预混料样品溶液的制备：
称取预混料约1g (精确到0.0001g)于100mL的容量瓶中，加入甲醇约70mL，置于50℃超声波水浴中处理20 min，冷至室温后用甲醇定容，充分摇匀。再取部分溶液用甲醇进行稀释，最终浓度约在50 ~ 120μg/mL，取部分溶液离心，上层清液通过0.45 μm滤膜过滤后，用于 HPLC测定。
进样：
将标准溶液和试样溶液各50μL依次注入仪器进行分析。（进样量可以根据不同的仪器自行调整）
色谱条件
色谱柱：Lichrospher 100 RP-8, C8, 5μm, 250mm × 4.0mm
流动相： 甲醇 （HPLC级）
流速： 1.0 mL/min
进样量： 50 μL
检测波长： 285nm
运行时间： 约7min
分析结果的计算：
样品中所含维生素E(mg/g)的效价可依照下式计算：
Cst × Wst × As × ns
维生素E =__________________________
W × Ast ×nst
式中：Cst — 维生素E对照品的含量，%；
Wst — 维生素E对照品的质量，m g；
Ast — 维生素E对照品的峰面积；
As — 样品溶液的维生素E峰面积；
nst — 维生素E标准溶液的稀释倍数；
ns — 样品溶液的稀释倍数；
W — 样品的质量，g。
注：如果样品中杂质太多，在高效液相色谱中与维生素E分离不完全，则应采用皂化的分析方法进行分析。
使用直接萃取的本方法进行多维预混料中维生素E醋酸酯的分析，其回收率可以高达95％以上，准确度非常的高。
