摘 要:本试验旨在研究两种铬源对热应激肉鸡抗氧化能力的影响。选择15日龄AA肉仔鸡180只,随机分为3组,1组高温不加铬(对照组),2组高温加酵母铬,3组高温加烟酸铬,铬添加量为3mg/kg,试验期4周(15~42d)。结果表明:日粮中添加3 mg/kg铬,显著降低了28d、42d 丙二醛和过氧化氢的含量(P<0.05),提高了抗超氧阴离子能力、总抗氧化能力及谷胱甘肽过氧化物酶的活性(P<0.05),显著提高了28d超氧化物歧化酶活性(P<0.05),但对42d超氧化物歧化酶活性无显著影响(P>0.05)。因此,热应激状态下,日粮中添加铬可减少脂质过氧化反应、降低过氧化产物生成、提高热应激肉鸡抗氧化能力,但两种铬源之间差异不显著。
关键词:铬;热应激;抗氧化;肉鸡
肉鸡对温度非常敏感,适宜生产温度为19~26℃,当环境温度超过28℃时,其在生产性能、生理机能等方面会受到明显的不良影响,生产者必须采取各种不同的措施来减少热应激所带来的损失。为了缓解或解除热应激对肉鸡的不良影响,除了改善饲养管理和环境外,更重要的是通过营养调控措施来缓解热应激,提高生产效益。铬是动物体内必需的微量元素,于1797年被Louis Vauquelin 首次发现,直到1955年,Mertz和Schwars用大鼠试验证明,铬是大鼠葡萄糖利用的必须产物,人们才真正认识到铬的营养作用。近几年的研究证实,日粮中添加铬可有效缓解热应激引起的生产性能下降,提高免疫力。王刚等(2003)研究表明,日粮中添加铬元素,可改善肉鸡生产性能和酮体品质。罗绪刚等(1999)研究表明三价铬可有效提高饲养肉仔鸡的免疫功能。而铬对热应激肉鸡抗氧化性能影响的研究鲜有报道。本试验通过向日粮中添加3mg/kg铬(前期试验筛选),研究了两种铬源对肉鸡抗氧化性能的影响,为铬在生产实际中的应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物及分组
选择1日龄AA肉仔鸡预试两周后,选择180只健康、体重相近的肉仔鸡,随机分为3组,每组6个重复,每个重复10只鸡。1组为高温不加铬组(对照组),2组为高温加酵母铬组,3组为高温加烟酸铬组,铬添加量为3mg/kg。酵母铬铬含量为1 000mg/kg,烟酸铬铬含量为400mg/kg。预试期两周(1~14d),正试期4周(15~42d)。
1.2 饲养管理
进雏前搞好消毒工作:进雏前7d,冲洗地面、墙壁及育雏设备;进雏前5d,甲醛熏蒸消毒,按每立方米空间30mL甲醛、15g高锰酸钾对鸡舍进行熏蒸,密闭24h。在人工气候试验室内进行试验。高温模型的建立:每天上午7:30开始升温,到9:00升至35℃左右,从9:00~17:00维持35±2℃ 8h,19:00降温至28℃左右,直至次日清晨7:00,温度维持在28±2℃,相对湿度60%~70%。试验鸡采用笼养方式,自由采食和饮水,按常规进行免疫,预试2周后,进入正试期,定期清理粪便,1~2周龄24h连续光照,以后逐渐过渡为自然光照。用干湿球温度计记录鸡舍内温度和湿度,每天记录3次,分别为上午8:00、下午14:00和晚上20:00。
1.3 基础日粮组成及营养水平
基础日粮以玉米和豆粕为主要原料,参照NRC(1994)和中国肉仔鸡饲养标准配制。全期分为0~21日龄、22~42日龄两个饲养阶段。两阶段基础日粮组成和营养水平见表1。
表1 基础日粮组成及营养水平 %
0~21日龄 | 22~42日龄 | |
玉米 豆粕 鱼粉 石粉 磷酸氢钙 食盐 油 预混料 ME/(MJ/kg) CP Ca P Lys Met Cr/(mg/kg)a |
57.9 32.0 3.0 0.9 1.4 0.3 3.5 1.0 12.47 20.62 0.97 0.50 1.05 0.36 0.673 |
62.3 28.8 2.0 0.9 1.4 0.3 3.3 1.0 12.59 19.0 0.89 0.46 0.94 0.33 0.785 |
预混料组成(每千克饲料中):0~3w,Mn 66mg;Zn 44mg;Cu 9mg;Fe 50mg;I 0.4mg;VA 8 000IU;VD3 1 000IU;VE 30IU;VK3 1mg; VB1 1mg; VB2 5.5mg; D-泛酸钙 12mg;烟酸 50mg;VB6 2.5mg;VB12 0.6mg。4~6w,Mn 66mg;Zn 44mg;Cu 9mg;Fe 50mg;I 0.4mg;VA 7 000IU;VD3 875IU;VE 20IU;VK3 1mg;VB1 2mg;VB2 4.5mg;D-泛酸钙 12mg;烟酸 50mg;VB6 2.5mg;VB12 0.6mg。
a:实测值。
1.4 试验方法与指标测定
应用紫外分光光度法测定过氧化氢(H2O2)、化学比色法测定超氧阴离子(O2- ·)、硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)、比色法测定总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶的活性(GSH-Px)。
以上试剂盒均由南京市建成生物工程研究所提供。
1.5 统计分析
统计数据利用Excel表和SAS8.1软件方差分析过程(ANOVA)进行,试验数据以 “平均数±标准差”表示。
2 结果与分析
2.1 对热应激肉鸡血清中H2O2、MDA、O2- ·含量的影响
由表2可知,日粮中添加铬显著降低了28d、42d热应激肉鸡血清中H2O2、MDA的含量(P<0.05),显著提高了抗超氧阴离子的能力(P<0.05);两种铬源之间差异不显著(P>0.05)。
表2 两种铬源对热应激肉鸡血清中H2O2、MDA、O2- ·含量的影响
日龄 |
组别 |
H2O2/(mmol/mL) |
MDA/(nmol/mL) |
O2- ·/(U/mL) |
|
1 |
87.17±37.53a |
2.35±0.74a |
84.27±12.43b |
注:同列间标字母相同、相邻和相隔分别表示差异不显著(P>0.05)、显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)。下同。
2.2 对热应激肉鸡血清中SOD、T-AOC、GSH-Px活性的影响
由表3可知,日粮中添加铬显著提高了28d、42d T-AOC、GSH-Px的活性(P<0.05),显著提高了28d SOD的活性(P<0.05),对42d SOD活性无显著性影响(P>0.05);两种铬源之间差异不显著(P>0.05)。
表3 两种铬源对热应激肉鸡血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活性的影响
日龄 |
组别 |
T-AOC/(U/mL) |
SOD/(U/mL) |
GSH-Px/(U/0.1mL) |
|
1 |
11.86±3.43b |
140.66±59.81b |
1 866.67±61.66b |
3 讨论
肉鸡体内脂质含量相对较高,容易发生脂质过氧化反应,产生对机体有害的过氧化产物,且高温应激易引起机体生理功能紊乱,导致自由基大量生成,造成机体损伤。铬作为葡萄糖耐受因子的成分参与体内糖脂代谢,并可通过硫氢键使胰岛素结合到膜受体上,从而增加胰岛素效应,抑制胰岛素酶。刘军安等(2007)研究表明,铬可显著提高小鼠肝脏中SOD表达量,清除体内大量的自由基。张树球等(2006)报道,富铬中药剂可明显提高糖尿病脑、肝超氧阴离子自由基清除能力和抗氧化能力。
H2O2具有很强的氧化性,高温应激时可在机体内迅速生成,对动物机体造成很大的危害。MDA是过氧化脂质分解代谢的产物,与机体自由基产生成正比,可直接反映机体内脂质过氧化的程度,间接反映细胞损伤的程度。O2- ·化学性质活跃,可形成过氧化氢、羟自由基,并和体内多种物质如蛋白质、核酸等反应,造成机体细胞组织的损伤。本试验结果表明,日粮中添加不同的铬源能减少热应激肉鸡机体内H2O2和MDA的生成,提高机体抗O2- ·的能力,且两种铬源之间无显著差异。
T-AOC是用于衡量机体抗氧化系统功能状况的综合性指标,它是指谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶等酶促体系和由VE、谷胱甘肽、VC等组成的非酶促体系总的抗氧化能力。T-AOC的大小可反映机体抗氧化酶体系和非酶体系对外界应激的代偿能力以及机体自由基代谢的能力。SOD能有效清除自由基,阻断毒性更强的氢氧化阴离子的产生,对细胞起保护作用,机体内存在Mn-SOD和CuZn-SOD两种SOD,二者相加为总SOD(即T-SOD)。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的抗氧化酶,其活性将影响机体内活性氧自由基水平及脂质过氧化终末代谢产物MDA的含量,起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。本试验结果表明,高温时日粮中添加适量的铬能显著提高肉鸡机体的T-AOC、SOD和GSH-Px的活性,两种铬源之间无明显差异,能保护肉鸡机体免受氧化反应的危害。
4 结论
日粮中添加适量的铬能有效提高热应激肉鸡的抗氧化性能,两种铬源之间差异不显著。
(参考文献略)
饲料广角
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